फस्फोरिक एसिड पेप्टाइड को समझ

यसले जीवन प्रक्रियाहरूमा महत्त्वपूर्ण भूमिका खेल्छ, फास्फोरिलेटिंग Tyrr, Ser, Thr, पेप्टाइडहरूमा अवस्थित छ।फास्फोरिलेटेड एमिनो एसिड सामान्यतया फस्फोरिक एसिड पेप्टाइडको उत्पादनमा प्रयोग गरिन्छ, हाल एकल फिनाइल फास्फोरिलेटेड एमिनो एसिडहरूमा प्रयोग गरिन्छ।HBTU/phosphorylated एमिनो एसिडहरू सामान्यतया phosphorylated एमिनो एसिडहरू HOBt/DIEA विधि जडान गर्न प्रयोग गरिन्छ, तर फस्फोरिक एसिड पेप्टाइडले यो दृष्टिकोण दोषहरू छनौट गर्दै छन्, विशेष गरी उत्पन्न धेरै लामो पेप्टाइड पेप्टाइड वा एमिनो एसिड फस्फेटमा, जडान गर्ने दक्षता कम छ। अन्तिम उत्पादन को शुद्धता।यस phosphopeptide को लागी, हामीले एक छनौट पोस्ट-phosphorylation दृष्टिकोण विचार गर्यौं।पेप्टाइड संश्लेषण पछि लेबल गर्न आवश्यक एमिनो एसिड साइड-चेन सुरक्षात्मक समूहहरूको चयनात्मक हटाउने प्रक्रिया हो।Tyr को लागि, Thr ले असुरक्षित साइड चेनहरूसँग एमिनो एसिडहरू प्रयोग गरेर सीधा प्रतिक्रिया गर्न सक्छ।-Ser (trt), मात्रात्मक रूपमा 1% TFA / DCM वातावरणमा हटाइयो।

फास्फोराइलेशन, डबल बेन्जिन फस्फाइट फस्फोरामाइड र चार नाइट्रोजनको साथ उत्पन्न हुन्छ र फास्फोरामाइड टेट्राजोलियम सक्रिय मध्यवर्ती, हाइड्रोक्सीसँग जोडिन्छ, त्यसपछि एसिड पेरोक्साइड ओक्सीकरण अन्तर्गत फस्फोरिल गठन, पूर्ण प्रतिक्रिया हुन्छ।

वर्तमानमा, पेप्टाइड फास्फोरिलेटेड परिमार्जन विधि त्यहाँ दुई मुख्य प्रकारहरू छन्:

(1) पोलिपेप्टाइड अनुक्रममा मध्यम रूपमा ग्यारेन्टी गरिएको फास्फोरिलेटेड एमिनो एसिडको प्रत्यक्ष परिचय;

(२) पेप्टाइड अनुक्रममा उत्पन्न भएको राल पछि, साइड चेन हाइड्रोक्सिलको Ser, Tyr, वा Thr phosphorylation मा।

1) मध्यम ग्यारेन्टी फास्फोरिलेटेड एमिनो एसिडले सीधा पेप्टाइड अनुक्रम परिचय गराउँदछ:

अर्थात्, एमिनो एसिडहरू जुन फास्फोरिलेटेड हुन आवश्यक छ, फस्फोरिलेटेड र उचित रूपमा (Thr, Ser वा Tyr) प्रयोग गरेर अग्रिम सुरक्षित गरिनेछ, र त्यसपछि सामान्य SPPS उत्पादन प्रक्रियामा आधारित पोलिपेप्टाइड सूचकांकको चयन बिन्दुमा फस्फोराइलेशनलाई संकुचित गरिनेछ। ।यो विधि सञ्चालन गर्न सजिलो छ, पेप्टाइड उद्यमहरू phosphorylated परिमार्जन को मुख्य विधि भएको छ।

2) पेप्टाइड अनुक्रममा उत्पन्न भएको राल पछि, Ser hydroxy phosphorylation, Tyr, वा Thr साइड चेनहरूमा:

पोलिपेप्टाइड विधिमा एकल संकुचनको फास्फोरिलेसन प्रयोग गरेर फोस्फोरिलेसन सजावट, साइड चेन सजावटमा ठूला समूहहरूद्वारा उत्पन्न स्टेरिक अवरोधका कारण, पेप्टाइड चेनसँग अमीनो एसिडहरूको फास्फोरिलेसनलाई संकुचित गर्न गाह्रो हुन्छ।भविष्यमा, एमिनो एसिडको परिचय अझ गाह्रो हुनेछ, विशेष गरी धेरै फास्फोरिलेसन साइटहरू भएको सजावटमा, पुस्ता धेरै गाह्रो हुनेछ, अन्तिम उत्पादन संरचना जटिल छ, अलग गर्न गाह्रो छ, र उपज अत्यन्त कम छ।

तसर्थ, जब पेप्टाइड चेनमा धेरै साइटहरू फास्फोरिलेटेड हुन्छन्, एकले रालमा पेप्टाइड अनुक्रम उत्पन्न गर्न छनौट गर्न सक्छ र त्यसपछि Ser, Tyr, वा Thr को साइड चेन हाइड्रोक्सिल समूहद्वारा फास्फोरिलेट गर्न सक्छ: यसको पुस्तामा मुख्यतया चयनात्मक हटाउने समावेश हुन्छ। साइड चेन सुरक्षात्मक समूह जसलाई पेप्टाइड संश्लेषण पछि एमिनो एसिडको पहिचान चाहिन्छ।Tyr को लागि, Thr ले प्रत्यक्ष रूपमा एमिनो एसिड साइड चेनहरू प्रयोग गर्न सक्छ प्रतिक्रियामा सुरक्षित छैन।

साइड चेन संरक्षण आधार १% TFA/DCM वातावरण मात्रात्मक रूपमा हटाउन सकिन्छ।जब यो विधि छनोट गरिन्छ, एक फास्फोरामिडाइट टेट्राजोलियम सक्रिय मध्यवर्ती डाइबेन्जाइल फस्फोरामिडाइट र टेट्राजोलियम प्रयोग गरेर उत्पन्न गर्न सकिन्छ, हाइड्रोक्सिल समूहसँग जोडिएको छ, र त्यसपछि प्रतिक्रिया पूरा गर्न पेरोक्स्यासिड वातावरणमा फस्फोरिल समूह बनाउन अक्सिडाइज गरिएको छ।