पुन: संयोजक प्रोटीन एन्टिजेनहरूमा प्राय: धेरै फरक एपिटोपहरू हुन्छन्, जसमध्ये केही अनुक्रम एपिटोपहरू हुन् र केही संरचनात्मक एपिटोपहरू हुन्।विकृत एन्टिजेनहरूका साथ जनावरहरूलाई खोप दिएर प्राप्त गरिएका पोलीक्लोनल एन्टिबडीहरू व्यक्तिगत एपिटोपेसका लागि विशिष्ट एन्टिबडीहरूको मिश्रण हुन् र प्राकृतिक संरचनाहरू वा विकृत लक्ष्य प्रोटीनहरू पत्ता लगाउन सामान्य रूपमा प्रयोग गर्न सकिन्छ।इम्युनोजेन्सको रूपमा विकृत प्रोटीनहरू प्रयोग गर्ने पक्षको फाइदा यो हो कि विकृत प्रोटीनहरू बढी इम्युनोजेनिक हुन्छन् र जनावरहरूमा बलियो प्रतिरक्षा प्रतिक्रियालाई उत्तेजित गर्न सक्छन्।
Escherichia coli को अभिव्यक्ति प्रणाली सामान्यतया एन्टिजेनिक उद्देश्यका लागि छनौट गरिन्छ किनभने यो समय र पैसाको हिसाबले सबैभन्दा महँगो प्रणाली हो।लक्ष्य प्रोटीन अभिव्यक्ति र शुद्धीकरण को सुविधा को संभावना सुधार गर्न को लागी, कहिलेकाहीँ लक्ष्य प्रोटीन को एक सानो टुक्रा, जस्तै एक विशिष्ट डोमेन, व्यक्त गरिन्छ।
प्रोटीन को त्रि-आयामी संरचना
एक प्रोटीन को विशिष्ट डोमेन
यदि एन्टिबडी तयारीको उद्देश्य wb पत्ता लगाउनको लागि मात्र हो भने, एन्टिजेनको रूपमा सिंथेटिक सानो पेप्टाइड प्रयोग गर्न किफायती र छिटो छ, तर पेप्टाइड खण्डको अनुपयुक्त चयनको कारण कमजोर इम्युनोजेनिसिटी वा नन-रेजेनिसिटीको जोखिम हुन्छ।एन्टिबडी तयारीलाई लामो समयको आवश्यकता भएकोले, प्रयोगको सफलता दर सुनिश्चित गर्न पोलिपेप्टाइड एन्टिजेन प्रयोग गरी एन्टिबडीहरू तयार गर्न दुई वा तीन फरक पेप्टाइड खण्डहरू प्रायः चयन गरिन्छ।
खोपको लागि पोलिपेप्टाइड एन्टिजेनको शुद्धता ८०% भन्दा बढी हुनु आवश्यक छ।यद्यपि उच्च शुद्धताले सैद्धान्तिक रूपमा राम्रो विशिष्टताका साथ एन्टिबडीहरू प्राप्त गर्न सक्छ, व्यवहारमा, जनावरहरूले सधैं ठूलो संख्यामा गैर-विशिष्ट एन्टिबडीहरू उत्पादन गर्छन्, यसरी एन्टिजेन शुद्धताका फाइदाहरू लुकाउँछन्।
थप रूपमा, सानो पेप्टाइडहरूबाट एन्टिबडीहरूको तयारी उपयुक्त क्यारियर एन्टिजेनसँग क्रस-लिङ्क गरिएको हुनुपर्छ यसको इम्युनोजेनिसिटी बढाउनको लागि।दुई सामान्य एन्टिजेनिक क्यारियरहरू KLH र BSA हुन्।
पोस्ट समय: मार्च-23-2023