लामो पेप्टाइड संश्लेषण को समस्या र समाधान

जैविक अनुसन्धान मा, एक लामो अनुक्रम संग polypeptides सामान्यतया प्रयोग गरिन्छ।अनुक्रममा 60 भन्दा बढी एमिनो एसिड भएका पेप्टाइडहरूका लागि, जीन अभिव्यक्ति र SDS-PAGE सामान्यतया तिनीहरूलाई प्राप्त गर्न प्रयोग गरिन्छ।यद्यपि, यो विधिले लामो समय लिन्छ र अन्तिम उत्पादन विभाजन प्रभाव राम्रो छैन।

लामो पेप्टाइड संश्लेषणका लागि चुनौती र समाधानहरू

लामो पेप्टाइड्सको संश्लेषणमा, हामी सधैं समस्याको सामना गर्छौं, त्यो हो, संश्लेषणमा अनुक्रम बढ्दै जाँदा संक्षेपण प्रतिक्रियाको स्टेरिक अवरोध बढ्छ, र प्रतिक्रिया पूरा गर्न प्रतिक्रिया समय समायोजन गर्न आवश्यक छ।यद्यपि, प्रतिक्रिया समय जति लामो हुन्छ, अधिक साइड इफेक्टहरू उत्पादन हुन्छन्, र लक्ष्य पेप्टाइडको एक भाग बनाइन्छ।यस्ता अवशेषहरू - कम पेप्टाइड चेनहरू लामो पेप्टाइड संश्लेषणमा उत्पादन हुने प्रमुख अशुद्धताहरू हुन्।तसर्थ, लामो पेप्टाइडको संश्लेषणमा, हामीले पार गर्नुपर्ने मुख्य समस्या भनेको उच्च गुणस्तरको प्रतिक्रिया अवस्था र प्रतिक्रिया विधिहरू अन्वेषण गर्नु हो, ताकि एमिनो एसिड संक्षेपण प्रतिक्रियालाई थप व्यापक र पूर्ण बनाउन सकिन्छ।थप रूपमा, प्रतिक्रिया समय घटाउनुहोस्, किनभने प्रतिक्रिया समय जति लामो हुन्छ, अधिक अनियन्त्रित साइड प्रतिक्रियाहरू, अधिक जटिल उप-उत्पादनहरू।तसर्थ, निम्न तीन बुँदाहरू संक्षेप गरिएको छ:

माइक्रोवेव संश्लेषण प्रयोग गर्न सकिन्छ: संश्लेषण प्रक्रियामा सामना गरिएका केही एमिनो एसिडहरूका लागि जुन एकीकृत गर्न सजिलो छैन, माइक्रोवेभ संश्लेषण प्रयोग गर्न सकिन्छ।यो विधिले उल्लेखनीय नतिजाहरू छन्, र प्रतिक्रिया समयलाई धेरै कम गर्छ, र दुई प्रमुख उप-उत्पादनहरूको गठन कम गर्दछ।

टुक्रा संश्लेषण विधि प्रयोग गर्न सकिन्छ: जब केही पेप्टाइडहरू सामान्य संश्लेषण विधिहरूद्वारा संश्लेषित गर्न गाह्रो हुन्छ र शुद्ध गर्न सजिलो हुँदैन, हामी पेप्टाइडको एक निश्चित खण्डमा पेप्टाइड चेनमा धेरै एमिनो एसिडहरूको सम्पूर्ण संक्षेपणलाई पूर्ण रूपमा अपनाउन सक्छौं।यो विधिले पनि संश्लेषणमा धेरै समस्याहरू समाधान गर्न सक्छ।

Acylhydrazide संश्लेषण प्रयोग गर्न सकिन्छ: पेप्टाइडहरूको एसिलहाइड्रजाइड संश्लेषण पेप्टाइड बन्धन विधि प्राप्त गर्न एमाइड बन्डहरूको गठन बीच एन-टर्मिनल साइस पेप्टाइड र सी-टर्मिनल पोलिपेप्टाइड हाइड्रोजाइड रासायनिक चयनात्मक प्रतिक्रियाको ठोस-चरण संश्लेषणको विधि हो।पेप्टाइड चेनमा Cys को स्थितिमा आधारित, यो विधिले सम्पूर्ण पेप्टाइड चेनलाई धेरै अनुक्रमहरूमा विभाजन गर्दछ र क्रमशः संश्लेषण गर्दछ।अन्तमा, लक्ष्य पेप्टाइड तरल-चरण संक्षेपण प्रतिक्रिया मार्फत प्राप्त गरिन्छ।यो विधिले लामो पेप्टाइडको संश्लेषण समयलाई मात्र कम गर्दैन, तर अन्तिम उत्पादनको शुद्धतालाई पनि उल्लेखनीय रूपमा बढाउँछ।

लामो पेप्टाइड शुद्धीकरण

लामो पेप्टाइड्स को विशिष्टता अनिवार्य रूप देखि कच्चा पेप्टाइड्स को जटिल घटक को नेतृत्व गर्दछ।तसर्थ, HPLC द्वारा लामो पेप्टाइड्स शुद्ध गर्न यो पनि चुनौती हो।polypeptide शुद्धिकरण प्रक्रिया को amyloid श्रृंखला, अनुभव को एक धेरै अवशोषित र सफलतापूर्वक लामो पेप्टाइड को शुद्धीकरण मा प्रयोग।नयाँ उपकरणहरू अपनाएर, धेरै शुद्धिकरण प्रणालीहरूको मिश्रण, दोहोर्याइएको विभाजन र अन्य अनुभव विधिहरू, लामो पेप्टाइड शुद्धीकरणको सफलता दर धेरै सुधारिएको थियो।